薄层色谱多重检测技术同时测定“红牛”功能饮料中的VB2、VB6、VB3、咖啡因和牛磺酸成分及TLC/MS结构验证

一种新开发的借助于HPTLC多重检测原理的高通量检测方法被用来同时对功能饮料（红牛TM）中的核黄素（VB2）、VB6、VB3、咖啡因及牛磺酸进行检测。10批功能饮料及6批普通饮料的样品溶液经超声法制备，薄层展开后的图谱进行多波长扫描：（1）261 nm和275 nm处分别对VB3和咖啡因作紫外吸收检测；（2）分别于366‐400nm范围和313‐340nm范围内对VB2和VB6作激发荧光检测；（3）薄层板以水合印三酮衍生化显色后在525nm对牛磺酸进行可见光检测。工作曲线相关系数r2>0.999。5种化合物3个浓度水平上的回收率试验结果在80‐106%范围内，重复性试验RSD在0.8‐1.5%之间。不同浓度水平中间精密度范围VB2为3.6‐7.4%、VB3为2.8‐6.3%、咖啡因为2.5‐4.4%、牛磺酸为2.1‐2.9、VB6为0.5‐4.0%。在正离子模式下以单级四级杆电喷雾质谱法对薄层板上成分进行结构验证，其中牛磺酸需要在负离子模式下进行。该方法简便可靠，为该类样品的常规分析提供了一种新的可替代方法。 为了确保产品质量，业界需要快速、可靠且经济的检测方法，新的HPTLC方法为此提供了一种可信赖的高通量替代方法。借助于高效薄层色谱分析的强大灵活性，使得低成本的同步检测如功能饮料中的核黄素（VB2）、VB6、VB3、咖啡因及牛磺酸等5类成分成为可能。这也是首次实现平行分离分析五种化合物并进行HPTLC/MS质谱验证，并通过HPTLC荧光检测对VB6进行定量测定。