使用定量发光试验检测病毒诱导的细胞病变效应

病毒感染哺乳动物细胞通常会降低细胞活力，并对细胞造成明显的影响，如形状或大小的改变，或与邻近细胞融合。这些变化被称为细胞病变效应 (CPE)，可以通过光学显微镜或成像系统对细胞病变效应进行评估，或者使用更多的定量检测手段对其进行测定。 Promega 公司的 Viral ToxGlo 检测试剂盒可以检测活细胞中存在的 ATP，并提供一种简单的发光检测方法来定量细胞活力。由于病毒诱导的 CPE 会耗尽细胞中的 ATP，导致发光信号的减少，因此可以定量检测宿主细胞中病毒诱导的 CPE。使用简单的混合 读取工作流程，即可轻松地在 SpectraMax iD5 多功能微孔板读板机上检测到试验结果，并使SoftMax Pro 软件进行分析 ( 图 1 )。这里，我们展示了如何使用 ViralToxGlo 检测试剂盒来测定病毒感染的哺乳动物细胞中的病毒感染力和半数组织培养感染剂量 (TCID50)，以 及如何测量化合 物的抗病毒效力。本研究采用了之前描述的两种病毒感染模型 : 甲型 H1N1 流感病毒 1 感染 Madin-Darby 犬肾 (MDCK) 细胞，人冠状病毒株229E(HCoV-229E)2 感染 MRC-5 人肺成纤维细胞。将两种具有抗病毒作用的化合物利巴韦林 3 和瑞德西韦 4 应用于暴露于病毒的细胞，并测定其抗病毒效力。