利用高内涵 3D 成像及分析，肺类器官可作为体外毒性评价的分析模型

类器官模型因其能够再现真实组织的复杂性而在生物研究和筛选中越来越受欢迎。为了模拟体内的人体肺器官，我们在有助于 3D 结构形成的条件下培养了原代人肺上皮细胞，重现了肺气道形态和功能上的特征。在肺类器官 培养中，上皮干细胞和祖细胞在添加了一系列生长因子的 ECM 中培养。类器官随后生长成复杂的结构，保留了多系上皮细胞簇。这些特性使类器官培养成为一种富有前景的手段，可以广泛应用于基础和转化方法，如药物筛 选和疾病建模。 这里我们阐述了一种高内涵成像方法，可以监测和可视化肺类器官的生长和分化，3D 结构的重建，类器官结构的复杂分析，细胞形态和活力，以及不同细胞标记物的表达。3D 肺类器官植入在 Matrigel domes。发育中的类 器官包括具有复杂形态的球形物体，包括腔和膀胱结构。在 8 周的生长过程中，我们监测到了大小和复杂性的增加。用透射光监测类器官，然后用 20-30 层 Z 轴扫描透过基质凝胶对染色的类器官成像，物镜倍数为 10 – 40x。使用 ImageXpress® Confocal HT.ai 智能化共聚焦高内涵成像分析系统新配置的激光光源显著的提高照明强度，从而显著提高了亮度、检测灵敏度和成像速度。