超高效液相色谱-高分辨质谱法测定肉类特征肽---意大利VELP漩涡振荡器

摘要：采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱法测定8条肉类特征肽,探讨色谱分离条件、净化方法和质谱参数对特征肽含量测定的影响。采用C18柱分离,以体积分数0.1%的甲酸水溶液和乙腈（含体积分数0.1%甲酸）为流动相梯度洗脱,电喷雾正离子化检测、采用飞行时间质谱的准多反应监测模式（time-of-flight mass spectrometry-pseudo-multiple response monitoring, TOF-MRM）采集方法定量测定。结果表明,目标特征肽的母离子带2个或3个电荷的信号强度高、稳定性好,二级质谱图中各肽段的碎片离子主要是y离子,且母离子带3个电荷的肽段中也有带2个电荷的碎片离子,使用TOF-MRM采集模式和目标增益采集数据可增加目标离子的灵敏度。优化后的梯度洗脱条件分离效果非常好,质谱信号强,8条合成肽标准溶液的质量浓度和检测响应的线性关系良好,其相关系数均大于0.98;检出限在0.19～1.50μg/L,TOF-MRM法准确度高,精密度和重复性均可满足要求。对牛肉丸制品中特征肽含量测定及鉴别发现,七类样品中共检测出5条特征肽,其种属来源分别为牛肉2条、猪肉1条、鸡肉2条,这表明测定的牛肉丸样品中不同程度地混有鸡肉或猪肉,且其混入量不等,与牛肉丸价格高低无关,而种属来源为鸭肉的2条特征肽未检出,这表明测定的牛肉丸样品中未混入鸭肉。该文建立了一种肉类特征肽的检测方法,为肉类蛋白质来源鉴定提供了有力的技术支持。 关键词：肉种属;肽标志物;高分辨质谱;准多反应监测;确证;