李氏增菌肉汤基础(LB1，LB2)操作步骤

产品名称：李氏增菌肉汤基础(LB1，LB2) 英文名称：Listeria Enrichment Broth Base 供应商：远慕生物 用 途：李氏增菌肉汤基础(LB1，LB2)用于李斯特氏菌的选择性增菌培养(GB 4789.30-2010)。 贮 存： 李氏增菌肉汤基础(LB1，LB2)贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。 规 格：250g 原 理： 胰胨、多价胨和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;李斯特氏菌可耐受较高含量的氯化钠，同时对肠球菌起抑制作用;磷酸二氢钾和磷酸氢二钠为缓冲剂;七叶苷为可发酵的糖类;萘啶酮酸和吖啶黄为选择性抑菌剂。 配方(每升)： 胰胨 5g 多价胨 5g 酵母膏粉 5g 氯化钠 20g 磷酸二氢钾 1.35g 磷酸氢二钠 12g 七叶苷 1g 最终pH7.3±0.2 使用方法： 1、称取 李氏增菌肉汤基础(LB1，LB2)49.4g，加入1000 mL蒸馏水或去离子水，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃灭菌15分钟。 2、每225ml基础加入LB1配套试剂1支(SR0100)(盐酸吖啶黄素2.7mg和萘啶酮酸4.5mg)，每200ml基础加入LB2配套试剂1支(SR0110)(盐酸吖啶黄素5.0mg和萘啶酮酸4.0mg)。 3、无菌采取检样25g(mL)放灭菌均质器中加225 mL LB1增菌液中，充分搅拌成均质。如不能及时检验，可暂存4℃冰箱。 4、LB1增菌液225 mL放30±1℃培养24小时后，取出0.1 mL加入10 mLLB2增菌液中二次增菌。于30±1℃培养24小时，做进一步的分离试验。 质量控制： 质控菌株接种LB1、LB2后于30±1℃培养24小时，结果如下： 菌 名 菌 号 生长状况 单核细胞增生李斯特氏菌 CMCC(B)54002 良好 大肠埃希氏菌 ATCC25922 受抑制 粪链球菌 CMCC(B)32223 受抑制