27nt-miRNA 对间充质干细胞向血管平滑肌细胞分化的 影响

为探讨27nt-miRNA 对间充质干细胞向血管平滑肌细胞分化影响，构建27nt-miRNA 过表达、反义序列 Anti-27nt-miRNA 以及阴性对照的表达质粒，慢病毒包装后分别转染人脐带间充质干细胞 (hUCMSC)，加入Ⅳ型 胶原诱导hUCMSC 定向分化为血管平滑肌细胞。四唑盐 (MTT) 比色法检测分化后细胞活力，免疫细胞化学染 色法检测分化后细胞SM22α (兔抗平滑肌22α，smooth muscle 22α) 的表达，Western 印迹法和RT-PCR 检测分化 后细胞内的SMA (兔抗平滑肌肌动蛋白，smooth muscle actin) mRNA、SM 22α mRNA 及其蛋白质表达情况。经 检测，27nt-miRNA 过表达分化组与阴性对照组相比，细胞活力下降20.48% (P<0.05)，SMA mRNA、SM22α mRNA 及其蛋白质表达量明显升高 (P<0.05)；而Anti-27nt-miRNA 分化组细胞活力上升了18.07% (P<0.05)，SMA mRNA、 SM22α mRNA 及其蛋白质表达量下降 (P<0.05)。综上所述，27nt-miRNA 能够促进间充质干细胞向血管平滑肌细 胞分化，并且抑制分化后的细胞活力。