质粒菌株产品操作说明书

一、扩增流程 收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。 （一）干粉质粒 产品规格：0.5～2μg质粒干粉，保证能转化出来，不保证具体含量，请务必先转化进感受态，再挑单菌落提取后再使用。 保质期限：90天，请尽快转化。 保存温度：一般在-20°C，置于-80°C保存时间更长。 运输方式：常温运输，1周内。 使用说明： 1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min； 2、从-80°C冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记； 3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min; 4、42°C热激90s，再冰浴2min; 5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min; 6、6000rpm离心5min，仅留100μl上清混匀菌体沉淀； 7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体； 8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h～16h; 9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要