人血白蛋白中杂蛋白的生物质谱分析.pdf

建立基于电喷雾质谱（ＥＳＩＱＴＯＦＭＳ）技术检测人血白蛋白中杂蛋白的方法，考察国内上市的２７家企业的２８批 白蛋白产品中的未知蛋白组分。方法　按２０１５年版《中国药典》四部通则３１２１方法，采用凝胶过滤色谱柱（Ｈｉｐｒｅｐ１６／ ６０ＳｅｐｈａｒｙｌＳ２００ＨＲ），对人血白蛋白中的各组分进行分离，并收集其中的二聚体、多聚体组分；经除盐、浓缩和胰蛋白酶酶解 后，采用ＢＥＨＣ１８（２１ｍｍ×１００ｍｍ，１３０?）色谱柱，以水（含０１％甲酸）乙腈流动相梯度洗脱，采用色谱质谱（ＭＳ）技术对多 肽进行二级质谱序列测定，并利用搜库软件（ＰＬＧＳ３０）分析鉴定人血白蛋白中的杂蛋白。结果　利用所建立的方法对２７家企 业的制品进行测定，共检测出２３种杂蛋白，其中载脂蛋白ＡⅡ（ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＡＩＩ）、人结合珠蛋白（ｈａｐｔｏｇｌｏｂｉｎ）、人血色素结 合蛋白（ｈｅｍｐｏｅｘｉｎ）、α１Ｂ糖蛋白（ａｌｐｈａ１Ｂｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ）与α２ＨＳ糖蛋白（ａｌｐｈａ２ＨＳｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ）等５种蛋白为所有企业产 品共有的杂蛋白；α白蛋白（ＶＥ结合蛋白）、Ｎ乙酰Ｌ丙氨酸酰胺酶、触珠蛋白相关蛋白，血红蛋白（β亚基，α亚基）、转甲状腺 素蛋白等蛋白大部分企业产品均存在。各企业杂蛋白数量分布在８～１７种之间，２７家企业产品杂蛋白种类数量差异较大。 结论　本方法可用于人血白蛋白中未知组分的研究，为人血白蛋白的生产工艺优化提供了指导。