人皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA试剂盒操作步骤

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人CORT抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人CORT会与包被抗体结合。依次加入生物素化的抗人CORT抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人CORT抗体与结合在包被抗体上的人CORT结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，CORT浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中CORT的浓度。 【样本处理及要求】 1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 3.组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红