抗原致敏IL-12基因修饰的树突状细胞诱导抗肾癌免疫的体外研究

【目的】 探讨肾癌细胞抗原致敏白介素-12（IL-12）基因修饰的树突状细胞（DC）体外诱导、激活细胞毒性T淋巴细胞（CTL）免疫杀伤肾癌细胞的效能及相关 免疫机制。 【方法】 采用重组逆转录病毒介导IL-12基因修饰人外周血单个核细胞(PBMC)来源的DC；超声细胞破碎法提取肾癌细胞粗提抗原（Ag）致敏经IL-12转染 的DC；ELISA法检测各组DCs和各组CTLs上清中IL-12、IFN-γ因子的分泌水平；流式细胞仪(FACS)分析各组DCs表面CD83 、CD86、HLA-DR的表达； MTT法检测DC刺激同源T淋巴细胞增殖的能力及CTL免疫杀伤肾癌细胞的效能；统计学分析比较各组间的差异。 【结果】 经IL-12基因修饰和抗原致敏后的DC高表达CD83 和CD86分子分别为(65.9%±3.1%, 92.8%±3.4%），分泌高水平IL-12 (279.6 ±1.7)pg/mL及IFN-γ (892 ±31)pg/mL，刺激同源T淋巴细胞增殖明显，诱导激活的CTL上清中IFN-γ水平(1146±31)pg/mL显著高于对照组；CTL对肾癌细胞 有强大的杀伤作用，显著高于各对照组。 【结论】 经IL-12基因修饰和抗原致敏后的DC能有效地诱导CTL特异性抗肿瘤免疫应答。其机制可能与IL-12基因修饰和抗原致敏活化了DC抗原提呈第二信 号，促进了DC高分泌IL-12因子，激活了T淋巴细胞致使CTL分泌IFN-γ的能力增强密切相关。