锤子
消耗积分 : 免积分
高效液相色谱-UM3000蒸发光散射检测器联用检测未衍生氨基酸 1.试剂与材料 1.1甲醇:色谱纯 1.2七氟丁酸:纯度≥98% 1.3三氟乙酸:纯度≥99% 1.40.2% 七氟丁酸(含0.1% TFA)溶液:精密吸取七氟丁酸1.00 mL,三氟乙酸0.50 mL溶于500 mL水,即得。 1.5 标准品:甘氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸、丙氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、脯氨酸、赖氨酸、组氨酸、缬氨酸、精氨酸、甲硫氨酸、酪氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸,纯度均大于等于98%。标准储备液 2.样品制备 精确吸取一定量氨基酸样品溶液,精确至0.001 mL,用水定容,使其中各氨基酸浓度范围在30 μg/mL~300 μg/mL之间。取5 mL经0.22 μm水系滤膜过滤后待测。 3.高效液相色谱测定 10.1 推荐色谱条件 a)色谱柱:PrevailTM-C18,5 μm,4.6 mm×250 mm(或相当型号色谱柱) b)流动相:溶剂A,七氟丁酸:三氟乙酸:水=1.0:0.5:500;溶剂B,甲醇 c)梯度洗脱:梯度条件见表1 d)流速:0.8 mL/min e)室温:常温(25℃) f)柱温:35 ℃ g)漂移温度:40 ℃ h)载气流量:2.5 L/min(推荐使用氮气) i)进样体积:10 μL
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