上海通微UM3000ELSD检测未衍生20种氨基酸的检测方法

高效液相色谱-UM3000蒸发光散射检测器联用检测未衍生氨基酸 1.试剂与材料 1.1甲醇：色谱纯 1.2七氟丁酸：纯度≥98% 1.3三氟乙酸：纯度≥99% 1.40.2% 七氟丁酸（含0.1% TFA）溶液：精密吸取七氟丁酸1.00 mL，三氟乙酸0.50 mL溶于500 mL水，即得。 1.5 标准品：甘氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸、丙氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、脯氨酸、赖氨酸、组氨酸、缬氨酸、精氨酸、甲硫氨酸、酪氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸，纯度均大于等于98%。标准储备液 2.样品制备 精确吸取一定量氨基酸样品溶液，精确至0.001 mL，用水定容，使其中各氨基酸浓度范围在30 μg/mL~300 μg/mL之间。取5 mL经0.22 μm水系滤膜过滤后待测。 3.高效液相色谱测定 10.1 推荐色谱条件 a)色谱柱：PrevailTM-C18，5 μm，4.6 mm×250 mm（或相当型号色谱柱） b)流动相：溶剂A，七氟丁酸：三氟乙酸：水=1.0：0.5：500；溶剂B，甲醇 c)梯度洗脱：梯度条件见表1 d)流速：0.8 mL/min e)室温：常温（25℃） f)柱温：35 ℃ g)漂移温度：40 ℃ h)载气流量：2.5 L/min（推荐使用氮气） i)进样体积：10 μL