氯霉素单克隆抗体的研制及其特性分析

为了研制氯霉素单克隆抗体，建立氯霉素的简便有效的检测方法。采用碳二亚胺(EDC)方法制备氯霉素免疫抗原和包被抗原，经SDS-PAGE凝胶电泳，三硝基苯磺酸(TNBS)法鉴定表明偶联成功。采用制备的抗原CAP-HS-BSA((CAP-HS，氯霉素琥珀酸酯；BSA，牛血清白蛋白)免疫Balb／c小鼠，通过杂交瘤技术获得了2株抗氯霉素的杂交瘤细胞株，细胞株体外传代和冻存复苏后抗体分泌稳定。经体内诱生法产生腹水，ELISA检测纯化腹水的效价为1：10。。抗体的亲和常数分别为：1．13x 10 L／tool，1．41 x 10 L／tool。ELISA检测显示这2株单克隆抗体与氯霉素琥珀酸交叉反应率为300 ，与其他抗生素及结构类似物的交叉反应小，表明该单抗可满足建立免疫学检测方法的需要和开发应用的要求。