抗克伦特罗单链抗体可溶性表达及特性鉴定

表达抗克伦特罗(CBL)可溶性单链抗体(scFv)并进行抗原结合活性鉴定。方法：利用呈现scFv的重组噬菌体感染大肠杆菌HB2151，IPTG诱导可溶性scFv表达。渗透休克法提取菌体细胞周质腔中scFv。经SDS．PAGE、Western．Blotting以及间接ELISA法分析检测可溶性scFv的表达，并采用间接竞争ELISA法鉴定scFv的抗原结合活性。结果：细菌培养上清及周质腔中均有抗CBL可溶性scFv表达，其分子量约为29kD；上清液及周质腔中scFv效价分别为1：80，1：1600，能够被CBL竞争性抑制，IC5o分别为0．78、0．95ng／ml。结论：可溶性抗CBL scFv在大肠杆菌HB2151中获得成功表达，表达的scFv与CBL具有很好的结合活性，可用于进一步建立CBL相应的免疫学检测方法。