抗盐酸克伦特罗单链抗体基因的克隆、序列分析及表达

提取分泌抗盐酸克伦特罗单克隆抗体杂交瘤细胞株的总RNA，通过RT—PCR技术，扩增vH和v 用一段柔性肽链一(G s)s将Vw和VfJ连接成ScFv。测序后经NCBI Blast分析，所得ScFv具有重组功能性鼠抗体可变区基因的特征。将所得目的基因与pET一22b(+)连接，转化E.coli BL21，用IPTG诱导表达，表达蛋白经SDS—PAGE分析，37 C培养5 h表达量较大，25 C诱导表达以可溶性为主。