锤子
消耗积分 : 20积分 移动终端:免积分
连续蔗糖梯度:日立CPMX或WX系列离心机,P40ST转头13PET管或13PA管。 单管配置: 1)13PET管:20%-50%(W/W)连续蔗糖梯度。 用0.01M Tris-Hcl配置蔗糖梯度:用20%,25%,30%,35%,40%,45%,50%(W/W)蔗糖液各1.5ml,从离心管低部逐层向上铺设(底部高密度),铺二管,直立在试管架上室温过夜,第二天早晨放入冰箱仅5℃预冷2小时。在蔗糖液上部加样品(约2ml)至距管口3mm。对称放入P40ST转头吊桶(转头及吊桶在冰柜中预冷过夜)对称双管,38,000rpm(256,000Xg)X 1小时,5℃ 加速8,减速7。 2)13PA管:20%-50%(W/W)连续蔗糖梯度 用0.01M Tris-Hcl配置蔗糖梯度:用20%,25%,30%,35%,40%,45%,50%(W/W)蔗糖液各1.2ml,从离心管低部逐层向上铺设(低部高密度),铺二管,直立在试管架上室温过夜,第二天早晨放入冰箱5℃预冷2小时。在蔗糖液上部加样品(约2ml)至距管口3mm。对称放入P40ST转头吊桶(转头及吊桶在冰柜中预冷过夜)对称双管,38,000rpm(256,000Xg)X 1小时,5℃ 加速8,减速7。
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