拟除虫菊酯ELISA检测方法

本方法应用了酶联免疫检测原理测定苄氯菊脂和相关的合成除虫菊酯。测试样品和包被有合成除虫菊酯特异性抗体的磁性颗粒一起加入到一次性测试管中孵育20分钟。 然后添加合成除虫菊酯酶结合物。样品中的合成除虫菊酯和合成除虫菊酯酶结合物相互竞争于磁性颗粒上的抗体结合位点。孵育30分钟，在反应中磁场应用于固定测试管中的顺磁颗粒（指结合合成除虫菊酯和酶标苄氯菊脂复合物的磁性颗粒，和它们的初始浓度成正比），同时允许把没有结合的试剂处理掉。在倒掉没有发生反应的试剂后用洗液清洗这些颗粒。通过添加酶底物（过氧化氢）和显色剂（TMB）可以检测到合成除虫菊酯。结合到合成除虫菊酯抗体上的苄氯菊脂酶标物催化底物/显色液混合物产了有色物质。经过30分钟的孵育，加入酸溶液终止稳定反应。因为酶标苄氯菊脂（结合物）和没有标记的合成除虫菊酯（样品）在反应中竞争于抗体位点结合，所以显色的深浅和样品中合成除虫菊酯的浓度成反比。