蜂王浆中10-羟基-2-葵烯酸液相色谱分析

10-羟基-2-葵烯酸是科学家从蜂王浆中分离出一种有机酸，其分子式为C10H18O3，称为10-羟基-2-癸烯酸（简称HAD），是蜂王浆的重要成分之一，是一种特殊的不饱和有机酸，由于这种酸在自然界的其它物质中没有，只存在于蜂王浆中，所以也称为王浆酸。10-羟基-2-癸烯酸含量是蜂王浆质量的重要指标之一，一般含量在1.4%～4%之间，约占总脂肪酸的50%以上。分离出的纯王浆酸呈白色晶体，在新鲜的蜂王浆中多以游离形式存在，性质比较稳定，有很好的杀菌、抑菌作用和抗癌、抗放射的功能。10-羟基-2-癸烯酸大大提高了蜂王浆的保健和医疗的效用。 一、试剂 1.本实验所用水为重蒸馏水； 2.甲醇：分析醇 3.乙醇：优级纯 4.内标物：对羟基苯甲酸甲酯含量99.0%； 5.10-HAD标准品：99.0%以上。使用前应在放有浓硫酸的减压干燥器内减压干燥24h; 6.10-HAD标准溶液：取干燥后的10-HAD标准品约25mg，精密称定，加无水乙醇溶解并移入1000ml容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。此溶液每毫升含内标物约0.65mg。 7.盐酸（C=0.03mol/L）：量取0.1mol/L盐酸100ml，加入200ml重蒸馏水中。 8.流动相：甲醇55%+0.03mol/L盐酸10%+水35% 二、仪器配置： LC-3000液相色谱仪：配紫外检测器，泵头带冲洗功能； 色谱处理工作软件：能通过电脑键盘输入LC-3000液相色谱仪所有参数，并能对柱温箱参数设定； 色谱柱：C18，250*4.6*10 或250*4.6*5 柱温箱； 离心机：不低于3000r/min，50ml 超声波清洗机； 漩涡混合器； 分析天平：精度0.0001g