锤子
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拟南芥又名阿拉伯芥,属十字花科,为二年生草本植物。具有植株形态小,平铺直径5cm,高30cm;生长区域小,易于培养;基因组小,只有5条染色体,15700万个碱基对,27000个基因;生长速度快,周期短,一个世代大约只需要6周的时间;可自花授粉,也可以在不同种质系间杂交,种子多,每株每世代可产数千粒种子等特点。因此,拟南芥是植物科学,包括遗传学和植物发育研究中的模式植物之一(图1)。在2000年,拟南芥成为了第一个基因组被完整测序的植物。 尽管拟南芥生长周期短,且易于培养,但根据不同的实验需求,在培养过程中,对光照、水分及湿度等各种条件的控制有所差别,利用PERCIVAL AR系列拟南芥培养箱可设置不同的生长环境,满足不同的实验需求。 一、正常培养 简单的拟南芥培养,可用于基因表达、器官发育、基因突变等研究。 1、首先把拟南芥种子放到滤纸上,用70%酒精进行消毒处理,再用无水酒精进行处理(也可选择20%漂白剂以及0.05% Triton X-100 非离子表面活性剂做杀菌处理20分钟)。用无菌水冲洗5遍,然后将种子点到MS培养基上,pH5.9,另加0.9%琼脂以及2%蔗糖。 2、把种子放到4℃黑暗条件下进行春化48h-72h左右,在长日照或短日照条件下催芽,然后转到PERCIVAL AR系列培养箱中(图2)。利用Intellus控制器,编辑简单的昼夜模式,设定光照时间16小时(黑暗8小时)或者光照14小时(黑暗10小时);选配Q23+连续光强调节装置,设定光照强度为100-150umol/m2.s;设定箱体内温度为光照条件下20-22℃,黑暗条件下18-20℃;选配湿度控制系统,设定箱体内相对湿度70%。 3、出苗大约7~10天,然后移入土中培养,采用底部灌溉方式浇水(利用土壤的毛细作用)。在第一次浇水前,可使土壤完全干燥,以后每隔7~10天浇一次水。 4、土壤可用营养土、蛭石以及珍珠岩比例10:1:1的比例配置,也可直接用堆肥、蛭石以及草炭等进行混合。在生长过程中,可用普通的花肥施肥一次或者不施肥。 5、当植株长到一定高度时,可剪断茎杆,以产生更多的花序,可用于转化研究或者获得更多的种子(图3)。 二、特殊培养 为了加快拟南芥生长速度,在移入土壤培养后,可设定长日照,利用Intellus控制器,编辑程序设定24h光照,光强100-250umol/m2.s,温度持续22-23℃。 拟南芥根系处理培养,可减少光照时间为8-12h,提高光照强度为100-350umol/m2.s,温度为光照条件下22-23℃,黑暗条件下18-20℃,其余培养条件同正常培养。
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