DNA序列测定技术说明书

目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger 等（1977）提出的酶法及Maxam Gilbert(1977)提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭，但这两种方法 ，都是同样生成互相独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸，每组寡核苷酸都有固定的起点，但却随机终止于特定的一种或者多种残基上。由于DNA 上的每一个 碱基出现在可变终止端的机会均等，因些上述每一组产物都是一些寡核苷酸混合 物，这些寡核苷酸的长度由某一种特定碱基在原DNA 全片段上的位置所决定。 然后在可以区分长度仅差一个核苷酸的不同DNA分子的条件下，对各组寡核苷 酸进行电泳分析，只要把几组寡核苷酸加样于测序凝胶中若干个相邻的泳道上，即可从凝胶的放射自影片上直接读出DNA 上的核苷酸顺序。