学分析样品制备（5）

             学分析样品制备（5）

第一章  样品制备的基础知识（5）

分析科学中选用相对标准偏差表示精密度的参数，在样品制备中精密度特别重要，变异性也能影响准确性，大家都知道，分析的重复性的下降是随浓度不成比例降低的，典型的关系如图 1-4 所示。它说明在痕量分析中不确定度比之常量和低含量分析要以指数方式增加，如果样品制备的步骤加进去附加的偏差会增加到这一曲线里，有把握地设想，在样品制备中其不确定度也会随浓度的降低而增加。一般来说仪器越来越精密，提供更为精密和准确的数据，可是另一方面样品制备就要求更苛刻了，它会对不确定度有更大的影响。再回到测定鱼中的农药残留的问题，最终测定要用计算机控制的气相色谱-质谱（GC-MS）方法进行分析，而样品制备包括在研钵中把肝研磨混匀，然后用索氏萃取器进行溶剂萃取、浓缩、净化，样品制备几乎要用一天的时间，而GC-MS也就是几分钟的事。样品制备包括几个不连续的步骤，有手动的操作，所以样品制备比起测定来讲其系统误差和随机误差都要大。

                        图 1-4  在分析测量中重复性是浓度的函数

样品制备对误差的相对影响决定于测量过程中它的步骤，例如，典型情况下在色谱分析过程中有三分之二是消耗在样品制备上，例如用液相色谱质谱（HPLC-MS）测定血浆中的抗精神病药奥氮平，可以说明这一情况，其中把样品和内标进行混合，然后用一支固相萃取（SPE）小柱进行样品净化，使用标准曲线进行定量分析，在这一方法中回收率为 67±4%，而十次重复测量的重复只有 1% 到 2%，详细的误差分析说明这一分析的不确定度有 75% 来源于样品制备过程。其余的不确定度来源于分析步骤，在分析不确定度中的 24% 的不确定度来源于校准，1% 来源于血清样品体积的变动，值得注意的是改进校准过程的测量要比改进 SPE 操作简单的多，在 SPE 中的变动性来源于小柱子本身、洗涤、萃取、干燥、或再溶解的步骤，具有很多的变动性要控制。

下面讨论在样品制备中减小不确定度的有用方法。

（资料来源：“Sample Preparation Techniques in Analytical Chemistry“，Editor J. D. WINEFORDNER，2003）

（RFU）