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液相色谱中使用C18柱的反相色谱法以生物体相关物质为分析对象,能够满足主要研究领域的需要,使用最为广泛。而随着硅胶原料、键合方式、封尾方式的不同,生产出的色谱柱性能也不同,市场上则因此有数以百计性能不同的C18柱。而评价这些色谱柱的性能一般需要从以下4点入手: 1、对化合物的保留能力; 2、对酸性及中性化合物的理论塔板数和峰形; 3、对极性(碱性)化合物的峰形; 4、对配位化合物的峰形。 针对上述四点原则,本公司建立了统一的标准,以此来评价自己生产的C18色谱柱。 具体测定方法如下: 样品:尿嘧啶-甲苯-苯乙烷-阿米替林-醌茜五种物质混合物; CoMetro高效液相色谱仪-等度系统(包括:6000LDI精密恒流泵,6000PVW紫外/可见可编程检测器); 紫外/可见检测器:波长210nm; 流动相:5mmol/L磷酸盐缓冲液(pH=7)-甲醇=20:80; 流速:1.0mL/min; 柱温:25℃
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