布鲁菌单克隆抗体乳胶凝集试验方法的建立

布鲁菌单克隆抗体乳胶凝集试验方法的建立 摘　要：建立了用纯化好的牛布鲁菌(B.abortus)单克隆抗体致敏乳胶的检测方法。通过试验确定了抗体致敏乳胶最佳偶联蛋白量为1.23 mg/mL，最佳致敏时间4 h，最佳的乳胶浓度为1%。水样模拟样本的制作，取含1.0×109cfu/mL灭活的B.abortus 544A生理盐水菌悬液各1 mL，加入9 mL自来水中，充分混合均匀，各取1 mL，土样、奶样模拟样本制作同上。最低检出率水样为3×104 cfu/ mL～1.0×105 cfu/ mL，土样、奶样为5×104 cfu/ mL～1.0×105 cfu/mL。 关键词：牛布鲁菌；单克隆抗体；乳胶凝集试验 布鲁菌(Brucella)是一种革兰氏阴性、胞内寄生菌。根据致病性的不同和宿主特异性，将布鲁菌分为6个种，即马尔他布鲁菌(B.melitensis)，牛布鲁菌(B.abortus)，猪布鲁菌(B.suis)，绵羊布鲁菌(B.ovis)，犬布鲁菌(B.canis)和沙林鼠布鲁菌(B.neotomae)[1]。布鲁菌能够感染人和多种动物，引起严重的人兽共患传染病。被感染的雌性动物主要表现流产，雄性动物主要表现不育，人类感染表现为发热，主要为波状热、肝脾肿大等症状，此病已经使世界各国遭受了巨大的经济损失，更重要的是布鲁菌能引起人的感染发病，威胁着公众健康，被一些西方国家列为生物战剂之一。早在1954年美国把猪布鲁菌研发成世界第一个生物武器，所以布鲁菌病的诊断和布鲁菌的检测一直受到世界各国的关注。 从近几年布鲁菌病的流行病学调查分析，在西方国家，人的布鲁菌病主要来源于感染的山羊；东方国家，人的布鲁菌病则主要来源于牛和猪；在城市，布鲁菌病主要来源是动物屠宰场。从发病的临床症状观察，布鲁菌病人不表现发热等明显的症状，呈现隐性感染，这种情况不仅为布鲁菌病的早期诊断带来了极大的困难，而且更有利于布鲁菌病的扩散。所以，急需建立快速、准确的检测方法，以达到早发现、早防治的目的[2]。本文报道一种快速检测牛布鲁菌(B.abortus)的乳胶凝集试验方法。