液相色谱分离柱的使用与维护方法

在前述仪器工作原理部分，我们已经指出，液相色谱仪的分离是在色谱分离柱中实现的。我们目前工作中多采用反相色谱柱 ，如何保护好分离柱减少柱的污染是延长柱寿命的关键。 3．1 怎样维护好色谱分离柱 加保护柱 （预柱 ）是保护分离柱的有效办法。保护柱是根内装填料与分离柱性质相近的短柱，接在分离柱之前，或代替流路过滤器。保护柱的作用是收集和阻塞分离柱 口的化学垃圾 ，这些垃圾如果直接进入分离柱会逐渐堆积在柱头，最终降低柱效能。保护柱是消耗品，如分析血浆样品，一般分析 50个样品后需更换新柱芯。避免高压冲击分离柱。一般色谱柱都能承受得起高压，但经不住突然变化的高压冲击，这将改变柱床体积，影响柱效。引起高压冲击的原因主要有：进样器的样品阀的缓慢转动、泵启动太快、柱切换等操作。用手动进样阀时的压力变化不大 ，自动进样阀由于切换较慢，可能会造成压力冲击。合理选择分离柱。我们知道，选择色谱分离柱主要根据两点，一是根据待测组分的分子量的大小；二是根据流动相条件，包括 PH值、离子强度和溶剂极性等。传统硅胶基质的键合相柱要求流动相 PH值在 3—7之间，极端 PH值 （>8）的流动相能溶解硅胶，使键合相流失。而目前利用先进的杂化颗粒技术研制的高纯硅胶颗粒填料