鼠药中毒检验方法系列讲座（5）—分析样品前处理

  1.1  对照样品制备：取空白胃或肝组织各2克，添加5~10μg氟乙酸钠 (浓0.01mg/mL)，混匀作阳性对照。同时取相同的空白组织2克平行操作，作阴性对照。
  1.2  提取方法：用丙酮水 (4:1) 5mL×2进行超声振提半小时，再浸提或放置过夜，离心后将浸提液浓缩至约2mL水液后，再离心吸取上清液用苯2~3mL振提半分钟，苯振提的目的，一方面为净化洗涤，另一方面可用来同时排除毒鼠强及常见的有机磷农药。苯洗涤后的水溶液用2mol HCl调pH2左右，用乙酸乙酯5 mL×2提取数分钟，离心分出上层乙酸乙酯，在合并的乙酸乙酯中加入0.2mL 10%三乙醇胺丙酮液，混匀，在60~70℃下挥干备用。
  1.3  衍生化方法：在挥干提取液的试管中，加入约0.5g无水硫酸钠和0.1g无水碳酸钾，再加100μl 的10%五氟苄基溴丙酮液，加2mL丙酮，盖严混匀，于微波炉中最低档加热2分钟 (或60℃下加热30分钟) 使其衍生化，取出振摇混匀、离心，上清液可进行GC-ECD分析。

   2.1  对照样品制备：取空白兔肝1.0g，添加氟乙酰胺纯品5μg (浓度0.01mg/mL)，混匀作阳性对照。同时取相同的空白组织1.0g平行操作，作阴性对照。
   2.2  提取方法：用丙酮水 (4:1) 5mL×2进行超声振提半小时，然后再振摇5分钟，合并在80℃下空气吹浓缩至<1mL，离心在上清液里再加2mL左右的丙酮，再浓缩至<1mL用苯洗涤一次，离心（苯液用于检验毒鼠强和有机磷农药），上清水溶液备用。
   2.3  衍生方法：将上一步的水溶液调为近中性，加100μl衍生化试剂DEPA及100μl催化剂DDC，用2mL×2乙酸乙酯强振5分钟，使其衍生及萃取，离心，分出乙酸乙酯合并，在60~70℃下用空气吹干，加200μl乙醇溶解残渣，然后进行GC-NPD定量分析。