聚乙二醇－聚乙烯亚胺介导小干扰RNA体外转染神经干细胞的研究

作者：梁嫣然 刘中霖 毕伟 帅心涛 王伟伟 陶恩祥 510120 广州，中山大学孙逸仙纪念医院神经内科(梁嫣然、刘中霖、陶恩祥)；510275 广州，中山大学化学与化学工程学院(帅心涛、王伟伟)；510630 广州，暨南大学附属第一医院神经内科(毕伟) 摘要：目的 研究聚乙二醇-聚乙烯亚胺(PEG-PEI)作为非病毒纳米载体介导小干扰RNA(siRNA) 体外转染C17.2 NSCs的效果。 方法 采用自行设计合成的PEG-PEI与靶向Nogo 受体复合体基因的siRNA 形成复合物，通过粒径与电位的测定、凝胶阻滞电泳实验等方法观察PEG-PEI/siRNA纳米复合物的表征及复合效果。以脂质体复合体系Lipofectamine 2000/siRNA 为对照，采用流式细胞仪检测不同N/P 比(PEG-PEI 中氮原子和siRNA 中磷原子的摩尔比)的PEG-PEI/siRNA复合物对NSCs的转染效率。 结果 PEG-PEI和siRNA形成粒径为纳米级别的复合物袁随着N/P比增大，复合物的粒径逐渐减小，而表面电位逐渐增大。凝胶阻滞电泳实验表明siRNA 与PEG-PEI可以通过静电相互作用而稳定结合。流式细胞仪检测细胞转染率后发现，N/P=15时，PEG-PEI/siRNA复合物转染率最高，可达(78.72依8.18)%。 结论 PEG-PEI 是一种有良好发展前景的非病毒型siRNA 转运载体，对神经干细胞基因治疗具有潜在的应用价值。 关键词：神经干细胞；转染；共聚物；载体