您还有0次抽奖机会
锤子
消耗积分 : 免积分
构建携带人alpha突触核蛋白真核重组质粒,检测其在人神经母细胞瘤SKNSH细胞中的表达及对细胞存活率的影响。方法 PCR扩增alpha突触核蛋白基因,产物纯化后与pcDNA3.1(+)载体进行连接反应, 构建pcDNA3.1(+)/alpha突触核蛋白真核重组质粒。Lipofectamine法转染人神经母细胞瘤SKNSH细胞,RTPCR方法检测SKNSH细胞中alpha突触核蛋白mRNA的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测其对细胞存活率的影响。结果 酶切鉴定及基因测序证明人alpha突触核蛋白基因已被完整、正确地插入到pcDNA3.1(+)载体中。RTPCR 结果显示该表达载体转染SKNSH细胞后,细胞内alpha突触核蛋白mRNA的表达水平明显增高,MTT方法检测结果显示该表达载体转染并未引起细胞存活率的改变。结论 alpha突触核蛋白真核重组质粒构建成功, 并可在SKNSH细胞内表达,且对细胞的存活率不产生任何影响,从而为进一步研究alpha突触核蛋白在帕金森病发病机制中的作用奠定了基础。
打开失败或需在电脑查看,请在电脑上的资料中心栏目,点击"我的下载"。建议使用手机自带浏览器。