士锋生物酵母分批培养实验操作方法

一、目的 1. 掌握微生物分批培养的生物反应器操作; 2. 掌握的菌体浓度、总糖等参数测定方法; 3. 掌握分批培养的生长动力学及生长曲线的测定方法。 4. 了解酵母的生长特性。 二、原理 分批反应操作是指基质灭菌、接种以后，除了好氧反应需要在反应过程中通入无菌空气、消除泡沫所用的消泡剂以及维持一定pH值所用酸碱之外，反应过程中不再加入反应基质。 基质浓度、产物浓度以及细胞浓度均随反应进行的时间而变化，尤其是菌体本身将经历不同的生长阶段(在培养的过程中，微生物的生长可分为迟缓期、对数生长期、减速期、静止期)，显示出不同的催化活力。 基本特征是：反应物料一次加入一次卸出;反应器物系的组成仅随时间而变化，即随着培养的进行，基质的浓度下降，菌体量增加，产物增加。因此它属于一非稳态过程。 三、主要试剂与设备 酵母、培养基、菲林试剂、0.05N NaOH 1mg/ml葡萄糖标准溶液等 100L机械搅拌式反应器、pH计、离心机、分光光度计等 四、步骤 (一)准备工作 1. 发酵罐的组装工作 (1) 连接好冷却水管。若采用自来水冷却，要考虑到白天与夜间水压的变化，尽可能采用耐压管，连接部要充分牢固，并且注意连接管管径与自来水管管径应一致。 (2)由于通人的空气有一定压力，应注意连接压缩空气的管子应能承受一定压力。 (3)安装pH及溶解氧等检测装置，注意各接线口不要出现差错。由于操作过程要和水打交道，故线路连接一定要注意安全，要特别注意防止漏电。 2. 种子培养