蜂王浆的分析（气相色谱法）

2.2.8 10羟基－2癸烯酸（简称 10－HDA）测定－赛谱SP7890气相色谱法 2.2.8.1 气相色谱装置及实验条件 A 色谱柱（固定液:3%硅油SE-30，载体：Chromosrb 60-80目，酸洗，硅烷化处理）； B 玻璃柱（3mm×200mm）； C 柱温190℃； D 进样口温度 250℃； E 氮气流量 40 mm／min； F 氢气流壁 50 mm／min； G 空气流量 1L／min； H 检测器：氢火焰离子化检测器。 2.2.8.2 试剂 A 乙醚； B 硅烷化试剂取：BSA［N，O一双（三甲基硅烷基）乙酸胺］和TMCS（三甲基氯硅烷）以2:l混合，用前配制； C 标准溶液：取10－HDA标准品，用三氯田院配制成0.2mg／ml溶液，备用； D 内标准溶液；取十七烷酸，用三氯甲烷配制成0.5 mg／ml的溶液。 2.2.8.3 操作步骤WWW.GC2010.NET 标准曲线绘制：精密吸取标准溶液 1，2，3，4，5 ml，分别置小锥形烧瓶中共加入 2ml内标准溶液，除去溶媒，最后分别精密加入硅烷化试剂0.5ml，密塞剧烈振摇混合，放置10min.精密吸取4微升注射入色谱仪、由所得到的色谱囹求得峰面积比，以峰面积比对重量比做图，绘成标准曲线。 试样分析精密称取蜂王浆试样约0.5g，置小烧杯中加30％氢氧化钠溶液2瓶并加少许蒸馏水使溶解，移入100ml容量瓶中用蒸馏水稀释至刻度、摇匀，精密吸取此溶液10ml。置150rnl分液漏斗中蒸馏水10ml，加1N盐酸数滴,使呈酸性（ph在3以下）用乙醚振摇抽提4次（40、20Χ3ml），乙醚抽提液合并于另一分液漏斗中，用蒸馏水洗3次，每次20ml,静置片刻、将乙酸层移入 200ml梨形蒸馏烧瓶中用旋转式蒸发器在40C下蒸发去乙醚，精密加入2ml内标准溶液，再用旋转式蒸发器在约65C下蒸发去三氯甲烷，然后通干燥氮气流除尽港媒及水分、以下按标准曲线绘制步骤进行硅烷化及气相色谱分析由所得的峰面积比，从标准曲线求得相应的重量比，并换算为重量按下列计算试样中10羟基-2癸烯酸的百分含量。 100 0.1 100 10－HAD%（按干燥品计算）=M×��×��× �� 10 W 100-A 式中：M－由标准曲线求得的10 ml试样溶液中 10－HDA毫克数；W－试样重量（g）；A－试样中所含水分百分率。 2.2.8.4 平行试验允许误差不得超过0.1％，取平均值确定结果。 注：（1）10－HDA亦可用高效液相色谱仪检测；（2）本标准中使用的重量，均非力的单位。