肺癌组织蛋白质混合物检测方法学研究

采用无胶筛分毛细管电泳一激光诱导荧光法(NGS—CE—LIF)检测蛋白质，考察了分离条件对分离的影 响，并对提取的肺癌组织蛋白质混合物进行分析，与毛细管电泳紫外检测(CE—uV)及常规蛋白质检测手段聚 丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)进行比较。异硫氰酸酯(FITC)衍生蛋白质，筛分介质为0．05％(w／V)聚环氧乙 烷(PEO，Mr=3oo0o0)，以TBE缓冲液(pH 10．O)为电极缓冲液，分离电压为15 kV，柱温15℃ ，氩离子激光 器(A =488 nm，A =520 nm)检测。在此条件下可对6．5～200 kDa范围的蛋白质进行分离，分离效果较 好，15 rain内完成分离，理论塔板数(Ⅳ)均值为9．12×10 ／m，检出限为0．28 mg／L。结果表明，本方法具有筛 分介质浓度调节简便，分离效果好，时间短等优点，具有一定的实际应用价值；对提取肺癌组织蛋白质混合 物进行检测，检测效率和效果优于CE—uV及PAGE。