裂解气相色谱系列讲座（44）

       裂解气相色谱系列讲座（44）

   裂解气相色谱的色谱条件 (3)

     4  保护柱

色谱柱被污染是影响 PyGC 实验重现性的重要因素。复杂样品的裂解产物中常含有难挥发的焦油状组分，这些产物进入色谱柱就会造成污染，使用一段时间后，色谱柱性能就会变差。解决这一向题的办法是定期在高温下重新老化色谱柱，或者用溶剂清洗 (对交联柱)。即使这样，仍会有一些污染物难以除去，因此有人提出来用填充预柱的保护措施。具体方法是在毛细管柱之前接一根短的填充柱．所用固定液与毛细管柱相同。这样，一些污染物就会被截留在预柱内，只要经常更换预粒填料，就可有效地保护毛细柱不被污染，同时还可提高整个色谱系统的分离效率。图 44 所示为溶菌酶在采用和不采保护柱两种情况下的高分辨PyGC图。如果不采用保护预柱，色谱柱在使用一段时间后惰性明显变差。而采用保护预柱后就消除了污染，保证了色谱柱性能，既可延长色谱柱寿命，降低分析成本，又能保证PyGC实验的重现性。

              图 44 保护预拄对溶菌酶裂解谱图的影响

      5．毛细管柱内径

现在PyGC常用的色谱柱内径为0.2—0.32mm的所谓常规内径柱，这种柱柱效高，制备相对容易。但它的样品容量较小，常需要采用分流方式，这就要求较高的操作技术，以保证实现线性分流．否则，一旦发生分流歧视，就会影响定量的准确性。为此，有人采用内径为0.53mm的所谓大口径柱，这种柱样品容量大，可不分流进样，自然可以保证定量推确性。然而，它的柱效远不及常规内径校高，往往不能满足复杂裂解产物分离的要求，且制备成本高。因此一般情况下还是使用常规内径柱为好。