我公司产ELISA试剂盒讲解

  1. 类别:分析方法/应用文章
  2. 上传人:上海万疆生物
  3. 上传时间:2014/8/30 9:57:07
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简介:

上海万疆生物技术有限公司生产的elisa试剂盒由于敏感性高,特异性强,重复性好,已被广泛应用在免疫学检验的各领域中,试剂盒中试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观,用于测定血清,血浆及相关液体等样本。 注:主要用于科研方面,不用于临床诊断。可以用于检测各种指标。 万疆公司为您讲解elisa试剂盒使用方法: elisa试剂盒使用方法一 :双抗体夹心法 1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 elisa试剂盒使用方法二 :间接法 1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜; 2.次日洗涤3次; 3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤; 4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml; 5.37℃孵育35-60分钟,洗涤; 6.’最后一遍用DDW洗涤。 其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。 上海万疆生物技术有限公司免费提供ELISA代测服务,万疆拥有自己的实验室(北京、南京、武汉)和技术团队,公司提供全方位的售前、售中、售后技术支持,为您解决实验过程中遇到的问题。 如有不清楚,详细请咨询:021-59576057

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