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锤子
葡聚糖凝胶 LH-20 洗脱溶剂分为两类:反相和正相两种。用得最多的是反相溶剂洗脱,以甲醇——水系统最为常见,先用水,逐渐增加甲醇比例,最后用100%甲醇冲柱。正相系统以氯仿——甲醇最为常见,先用50%氯仿——甲醇,逐渐增加甲醇比例,最后用100%甲醇冲柱。 如果样品极性大,选用反相溶剂洗脱(甲醇——水),样品用最少体积的甲醇——水(尽可能甲醇少一些)溶解,过滤后,湿法上样(必须要进行过滤!否则把葡聚糖凝胶LH-20 堵塞,就必须将葡聚糖凝胶LH-20的柱头部分弃去,造成不必要的浪费)。如果样品极性小,这选用正相溶剂洗脱(氯仿——甲醇),样品用最少体积的氯仿——甲醇溶解,过滤后,湿法上样。 梯度洗脱在葡聚糖凝胶 LH-20使用中并不象在正相柱层析中那么重要。首先你的样品须要能溶解在尽量少量的洗脱剂中。极性在的用甲醇水系统;极性小者一般用不含水的系统,常用正己烷二氯甲烷甲醇系统。
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