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锤子
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答:下列原则供您参考。 ◆TaqMan 探针位置尽可能靠近扩增引物(扩增产物50-150bp),但不能与引物重叠。 ◆长度一般为18-40mer 。 ◆G-C含量控制在40-80%左右。 ◆避免连续相同碱基的出现,特别是要避免GGGG或更多G出现。 ◆在引物的5’端避免使用G。 ◆选用比较多的碱基C。 ◆退火温度Tm控制在 68-70C左右。
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