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小鼠酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)ELISA Kit检验标本中含有酶标记物的干扰物 2、1内源性干扰物:类风湿因子(RF)、黄疸等,类风湿因子是可作用于多种动物以及人IgGFc段的自身抗体,多数为IgM类,能充当抗原成分与固相及酶标抗体反应,从而呈现非特异性显色。 黄疸血标本中常含有内源性过氧化物酶,如用辣根过氧化物酶为标记物,就有可能产生非特异性显色。 2、2 外源性干扰物,常常因样品采集、贮存、处理不当造成如样品溶血,被细菌污染,标本凝集不全等。溶血标本,红细胞溶解破裂,释放出血红素形成,而血红素中的铁卟啉是过氧化物酶的类似物,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP(辣根过氧化酶)[2],有国内报道酶免HBsAg试剂检测溶血标本时可造成假阳性[3]。如在冰箱中保存过久,其中的IgG可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深[2]。因此,血标本在采集处理时应小心,在冰箱中保存不易过久。 标本凝集不全时,血清中会残留部分纤维蛋白原,也易造成假阳性。
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