HDA法用于检测肉中金黄色葡萄球菌的研究

本文研究了猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉中金黄色葡萄球菌的依赖解旋酶恒温基因扩增检测方法(HDA法)，以金黄色葡萄球菌耐热核酸酶nuc基因为目的基因，设计一对特异性引物，优化反应条件UvrD helicase、T4 gp32的浓度，通过赖解旋酶恒温基因扩增方法直接检测猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉中金黄色葡萄球菌，扩增产物通过电泳进行检测。结果表明，HDA法检测肉中金黄色葡萄球 菌的特异性强，试验涉及的其它菌株未发生扩增，只有金黄色葡萄球菌得到与设计序列长度一致的216 bp基因片段，检出限为101 CFU/g，优化确定UvrD helicase、T4 gp32的终浓度分别为0.1 μg、5.0 μg，该方法用于检测猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉中金黄色葡萄球菌的灵敏度高，耗时短，为猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉中金黄色葡萄球菌的快速检测提供了新的方法，也为其它食品中金黄色葡萄球菌的 快速检测奠定了基础。