葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)

葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)说明书 注意事项： 1、ALP 硫化液易失效，最好分成小分储存，一经开启立即使用。 2、ALP 硫化液具有腐蚀性和刺激性气味，应小心操作。 3、对冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。 4、本染色液适用于冰冻切片，一般不固定，也可染色后固定，固定步骤非必须步骤。 5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 阴性对照(可选)： 将切片置入试剂(D)- G-6-Pase 对照液中，其余步骤相同，结果为阴性。 G-6-Pase 活性处 棕色沉淀 产品简介： 葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6 –phosphatase，G-6-Pase)是一种多存在于哺乳类动物肝、肾、肠等组织的膜结合酶，G-6-Pase 和微体紧密结合，定位于内质网，是内质网的主要标志酶，能把葡萄糖-6-磷酸水解成葡萄糖和磷酸。G-6-Pase 对维持血糖浓度的相对恒定有至关重要的作用，是糖代谢的关键酶。当血糖降低时，G-6-Pase 促进肝糖原转变为血糖。当缺乏G-6-Pase 时，会引起糖原分解障碍，使糖原积累在肝、肾、心脏等部位，导致肝糖原储积病。G-6-Pase 最适pH 为6.5，在pH6.0～8.0 亦可，pH8.0 最稳定，pH5.0易变性。组织化学反应多用pH6.5～6.7。 葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)采用重金属捕捉剂和磷酸结合显示酶的活性。该酶对固定很敏感，组织经80%乙酸溶液固定后用石蜡包埋，G-6-Pase 完全被抑制。需用新鲜组织低温恒冷切片，经甲醛短时固定酶即失活，但可短时低温丙酮固定，但一般不固定。 自备材料： 1、蒸馏水 2、温箱或水浴锅 操作步骤(仅供参考)： 1、冰冻切片入蒸馏水清洗。 2、入G-6-Pase 孵育液，37℃孵育15～20min。 3、自来水冲洗后，蒸馏水冲洗。 4、在上述过程中配制ALP 硫化工作液，即取试剂(B)用蒸馏水稀释50 倍, 即为ALP 硫化工作液，即配即用。切片入硫化工作液，孵育1min。 5、自来水水洗3～5min。 6、(可选)入中性福尔马林，固定2min。 7、入蒸馏水水洗2 次。 8、甘油明胶封片。