酸性磷酸酶染色液(硝酸铅法)操作步骤

注意事项： 1、ACP 孵育液、ACP 硫化液易失效，最好分成小分储存。ACP 硫化液具有腐蚀性。 2、对冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。 3、样本需新鲜，取材后应立即处理，否则会影响酶的活性。 4、组织固定需在4℃冰箱进行，时间不宜超过24h，否则酶活性会减弱或消失。 5、组织在石蜡包埋时，温度不宜高于56℃。应使用熔点为52～54℃的石蜡进行浸蜡，浸蜡时间要短，否则酶活性会减弱或消失。 6、不纯的二甲苯会分解黑色沉淀，宜选用AR 级以上的二甲苯。 7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 产品组成： 试剂(A): ACP 孵育液 50ml 4℃ 避光 试剂(B): ACP 硫化液 2×1ml RT 避光 试剂(C): ACP 对照液 10ml 4℃ 避光 产品简介： 酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)分布极广泛，遍布各种组织，主要存在于细胞的溶酶体内，所以常作为溶酶体标志酶。溶酶体外的酸性磷酸酶存在于内质网和胞质内。各种动物中的酸性磷酸酶各有不同，酸性磷酸酶的适宜pH 为4.5～5.5。 酸性磷酸酶染色液以β-栺油磷酸钠为底物，在酸性pH 下被酸性磷酸酶水解释放出磷酸盐，遇铅离子则格成磷酸铅沉淀，再被S2+置换，最终格成硫化铅棕黑色沉淀。酸性磷酸酶的一般抑制剂为氟化物、磷酸根离子。对某些酸性磷酸酶来讲，Cu2+、酒石酸根离子和四氯化碳以及醛类也都是抑制剂，Mn2+为该酶的激活剂。冰冻切片和石蜡切片均可，但多用冰冻切片。临床上，该染色法对前列腺癌和其他脏器的转移性前列腺癌呈强阳性反应，霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、乳腺癌、舌表皮性癌、多核巨细胞瘤的瘤细胞质也呈强阳性反应，Ewing 肉瘤、成骨肉瘤等呈阴性反应。