肉制品中瘦肉精液相色谱检测方法

盐酸克仑特罗又称“瘦肉精”，是一种肾上腺类神经兴奋剂。可明显促进动物生长，并增加瘦肉率。它能够改变动物体内的代谢途径，促进肌肉，特别是骨骼肌中蛋白质的合成，抑制脂肪的合成，从而加快生长速度，瘦肉相对增加，改善肉体品质。很快瘦肉精就被运用于饲料中，促使猪等畜禽生长速率、饲料转化率、胴体瘦肉率提高10%以上，所以盐酸克仑特罗在作为饲料添加剂销售时的商品名又称为“瘦肉精”、“肉多素”等。人体食用瘦肉精会出现急性中毒、甲状腺功能亢进、导致心律失常、过敏等现象。 早在2002年9月10，在中国境内就禁止在饲料和动物饮用水中使用盐酸克伦特罗。尽管盐酸克伦特罗的使用已明令禁止，但仍有不法经营户违法使用。因此，相关检测部门也加大监测力度。胶体金快检卡是最简单也是最常用的瘦肉精检测工具，由于检测准确性较低，仅用于大量筛查检测，进一步确证还需使用高效液相色谱法。使用高效液相色谱仪检测肉制品中瘦肉精残留的方法专属性好、选择性强、检测精确度较高，而且假阳性率低。 液相色谱仪适合测定热不稳定和强极性的β-激动剂及其代谢产物，而且HPLC可以与柱前提取、纯化及柱后荧光衍生化反应和质谱(MS)等系统联用，容易实现分析过程的自动化。肉制品中瘦肉精残留液相色谱检测方法及步骤如下： 检测仪器：高效液相色谱仪（配备恒流泵、紫外检测器、六通进样阀、色谱工作站）、固相萃取仪、氮吹仪、柱温箱 　 　　 检测试剂：乙醚、正己烷（分析纯）、甲醇（色谱纯）、盐酸溶液、乙酸缓冲液 、NaOH溶液、甲醇液、盐酸克伦特罗标准液 　 　　 样品制备：提取和净化取猪肉样品10g，加入30ml lmol／L盐酸溶液匀浆，超声波振荡3h，5000r／mln的速度离心10min，取上清液用lmol／L NaOH溶液滴至碱性，乙醚或正已烷抽3次，抽提液在氮吹仪上蒸发至5ml后上固相萃取小柱，以除去大部分杂质；洗脱液上固相萃取小柱，将待测成分吸附在小柱上，用0．05mol几乙酸缓冲液（pH7．0）洗涤小柱3次，0.3mol／L乙酸缓冲液洗脱待测成分，冷冻干燥，用0．5ml甲醇液溶解后取100uL供高效液相色谱仪检测。 　　 　　 色谱条件 色谱柱：C18柱（250mmX4.6mm ） 流动相：甲醇—水（75 25） 流速：0．65ml／min 　　 检测波长：243nm 　　 进样量：100uL 　　 柱温：室温30℃ 　　 　 检测结论：本方法在猪的肌肉和肝脏组织中的检测限为0．001ug/g’回收率范围为80％±20％。 本文地址：www.hxsj17.com