液相色谱耦联Q Exactive 台式轨道阱质谱仪分析利妥昔单克隆抗体

在本研究中，我们提供一种新流程，结合快速色谱，利用两种规格的整体柱和高分辨Orbitrap质谱仪，对完整及还原利妥昔进行了分析，采用AIF，Multiplexed HCD自上而下的裂解，以及自下而上的分析方法进行序列验证。 即使抗体的上样量低至500pg,我们仍可以得到高质量的质谱图，该数据证明了LC-MS仪器的高灵敏度。此外，为了分析还原型单克隆抗体，我们采用色谱的方法将抗体的重链和轻链分开，设置不同的分辨率对其进行检测。 通过这个流程，我们可以测定完整抗体的分子量，对轻链和重链的氨基酸序列进行确认和验证，对该抗体不同糖基化形式的相对丰度进行鉴定和评价。