洗板机在ELISpot实验中的应用

ELISpot是指固相酶联免疫斑点技术，主要用于检测细胞分泌的抗体和细胞因子。ELISPOT法源自ELISA，又突破传统ELISA法。ELISA通过显色反应，在酶标仪上测定吸光度，对目标蛋白定性或定量。ELISPOT通过显色反应，在细胞分泌待测蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点，可直接在显微镜下人工或通过分析系统自动对斑点进行计数。一个斑点代表一个活性细胞，从而计算出分泌该蛋白或者细胞因子的细胞的频率。 ELISpot微孔板一般使用PVDF膜为底，膜上包被特异的抗体。细胞种植在孔中，分泌的蛋白或细胞因子会被抗体捕获。经过与ELISA类似的一系列洗板、显色、终止和干燥后，即可观察和判读。 ELISpot的洗板步骤相比ELISA更加要求严格，既要求洗涤充分，去除多余的细胞、未结合的抗体和底物，又要避免不当的操作损坏PVDF膜。自动化的洗板机比人工能提供更高效、均一和安全的洗板效果。