ELISA抗原竞争法检测sIL-2R含量的操作流程

【操作步骤】 （1） 以一定浓度的纯化或重组的IL-2R（P55）蛋白包被96孔酶标板，100ul/孔，4℃过夜（16-72h）； （2） 弃包被液，用1%BSA-PBS封闭非特异性结合位点，200ul/孔，置室温2h； （3） 用洗涤液加满各孔置3min，然后倾去，反复洗涤3次； （4） 分别加入不同稀释度的sIL-2R标准品及待测样品，50μl/孔； （5） 各孔均加入FITC标记的IL-2R McAb，50μl/孔，充分混匀后置室温2h； （6） 同上洗涤3次； （7） 各孔均加入碱性磷酶酶标记的兔抗FITC抗体，100μl/孔，置室温1h； （8） 同上洗涤3次； （9） 各孔均加入底物液，100μl/孔，置室温15-30min； （10） 用酶标仪以波长405nm测各孔OD值。 【结果分析】 （1） 以sIL-2R标准品各稀释度对应的浓度值为横座标（X），相应的OD值为纵座标（Y），在普通座标纸上绘制竞争抑制标准曲线，OD值随标准品sIL-2R浓度升高而降低。 （2） 根据待测样品所测得的OD值，在标准曲线上查得样品sIL-2R含量。 （3） 本方法测定sIL-2R含量时，不需要计算抑制百分率。 酶免试剂盒（ELISA KIT） 自身免疫系列酶联免疫试剂（ELISA）：抗核抗体（ANA） ，抗中心粒胞浆抗体，双链DNA， ENA抗体，ENA-Profile抗体，Sm/RNP抗体，Sm抗体，Jo-1抗体，Scl-70抗体，SS-A抗体， SS-B抗体，抗甲状腺球蛋白抗体（TG-Ab），抗心磷脂抗体IgG（ACA IgG），抗心磷脂抗体IgA（ACA IgA），抗心磷脂抗体IgM（ACA IgM），髓过氧化物酶，蛋白酶3，抗甲状腺过氧化物酶（TPO），?2糖蛋白，抗麦胶蛋白IgG，抗麦胶蛋白IgA，类风湿因子 IgM