人前胶原C端肽酶酶标仪的使用过程中的一些问题

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中前胶原C端肽酶(PCP)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人前胶原C端肽酶(PCP)水平。用纯化的人前胶原C端肽酶(PCP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入前胶原C端肽酶(PCP)，再与HRP标记的前胶原C端肽酶(PCP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的前胶原C端肽酶(PCP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人前胶原C端肽酶(PCP)浓度。 人前胶原C端肽酶酶标仪的使用过程中的一些问题： 1．阈值可疑范围的设定 一般酶标仪阈值矩阵设定可设定阴性、可疑、阳性3个范围。有经验表明可疑范围的设定要设定为临界上下15％(也称灰色区)为宜；同时阴性范围下限和阳性范围应该充分考虑到影响ELISA结果因素的存在，可疑范围上限必须考虑到双波长情况下出现负吸光度值和超范围报告影响结果的可能性。“灰色区”的结果的真实性是ELISA定性测定中最需要把握的环节，也是实验室引起医疗纠纷的主要方面，因此必须对可疑结果进行复检，最好用两种试剂盒。 2．样板程序文件设定 一个实验室同一试验可能使用不同厂家试剂盒，但不同试剂盒规定的设定对照数量、阈值判定标准等均可能不一致，酶标仪所设样板程序也不一致。为了使用方便，可在样板程序文件中用后缀加以区别。