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锤子
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PTM位点鉴定错误的概率较高,将位点错误的鉴定结果作为谱图库,会导致DIA解析结果的不可靠。实验使用Thermo ScientificTM Orbitrap Fusion三合一质谱仪,基于ptmRS/phosphoRS建立可靠的翻译后修饰DIA流程,突破了PTM DIA解析的瓶颈。使用phosphoRS/ptmRS筛选PTM定位准确的谱图,作为谱图库用于DIA,结果显示,具有精确PTM定位的谱图库中98.4%的磷酸化肽都获得了可靠的DIA解析(Q<0.01),峰面积CV值<20%的肽段占86.9%,实现了准确可靠的大规模PTM DIA定量。
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