TSK-GEL SuperSW 系列色谱柱的性能介绍

可前往以下我司资料中心页面地址进行搜索下载http://www.meuron.com.cn/download.asp 简介: 由于分析速度快，易于使用以及灵敏度高，高效液相色 谱被广泛用作生物大分子领域的分离/纯化方法。尤其是， 基于分子尺寸的分离模式，即大家熟知的尺寸排阻色谱 （SEC），由于高效且对蛋白的流动相条件温和，已经用作 蛋白质分离/纯化的首选方法。在具有网状结构的软填料（如 葡聚糖、琼脂糖等）被用作早期的尺寸排阻色谱的填料之后， 刚性更好的硅胶型填料也开始应用于高效液相色谱的尺寸 排阻色谱中。 TSKgel SW 系列色谱柱是一类硅胶型尺寸排阻色谱填 料，孔径分布适合于蛋白质的分离，并且由于出色的分离效 果，在全世界范围内均被广泛应用。 在高效液相色谱领域，人们还在不断地追求高速度与高 分离度。最近，由于上样量有限和/或浓度更低，对于现在 痕量分析中高灵敏度的需求也不断增长。在其它 HPLC 分 离方法中，包括反相色谱（RPC）、正相色谱（NP）以及离 子交换色谱（IEX），适用于痕量分析的半微量色谱柱已经 商业化。在 SEC 领域，适用于痕量分析的高灵敏度、高分 离度 HPLC 色谱柱的需求也在不断增长。 本报告阐述了 TSKgel SuperSW 系列色谱柱的特点、 基本特性及其应用。这些色谱柱，填料颗粒比常规的 TSKgel SW 系列色谱柱更小，色谱柱也缩小了尺寸，可以获得高灵 敏度和高分离度。 特点: 表 1 列出了 TSKgel SuperSW 和 TSKgel SuperSWXL 系列色谱柱的规格。如表所示，由于 TSKgel SuperSW 色 谱柱粒度变小，其理论塔板数大约是常规高效 TSKgel SWXL 系列色谱柱的 1.5 倍。另外，表 2 表示 TSKgel SuperSW 系列色谱柱的对 PEG、葡聚糖和蛋白质的分离范围。在图 1 和图 2 分别表示聚乙二醇（PEG）标准品和蛋白质标准品 使用 TSKgel SuperSW 系列色谱柱制得的校准曲线。由于 TSKgel SuperSW 系列色谱柱与相应等级的常规 TSKgel SWXL 系列色谱柱具有相同的校准曲线，因而，具有相同的 分子量分离范围。通常，TSKgel SuperSW2000 适合分离 分子量为 70,000Da 或更 小的蛋白质 ，而 TSKgel SuperSW3000 则 适 合 分 离 分 子 量 为 70,000——300,000Da 的蛋白质。 图 3 和图 4 表示在 TSKgel SuperSW 系列色谱柱和常 规的 TSKgel SWXL 系列色谱柱上蛋白质标准品的色谱图。 分析过程使用带有微流通池的紫外检测器。相对于内径为 7.8mm 的 TSKgel SWXL 色谱柱，TSKgel SuperSW 色谱柱 4.6mm 的内径明显提升了峰高。表 3 表示由这些图谱计算 得到的分离度（Rs）。从表中可以清楚地看到，与 TSKgel SWXL 系列色谱柱相比，TSKgel SuperSW 系列色谱柱的分 离度大约为 1.2 倍。 图 5 和图 6 表示在分离度几乎相等的条件下 TSKgel SWXL 系列色谱柱和 TSKgel SuperSW 系列色谱柱的分析时 间比较。TSKgel SuperSW 系列色谱柱柱效更高，相对于 TSKgel SWXL 色谱柱，分离时间减少 50%，而未损失分离 度。