亲水作用色谱法（HILIC）分析食品中的氨基酸

氨基酸的HPLC分析通常主要采用三种方法进行分析：（1）柱后标识：使用离子交换色谱柱分离样品后，使样品与OPA或茚三酮等衍生剂反应，然后用UV或荧光法进行检测；（2）柱前标识：用色谱柱分离预先与衍生剂反应的分析物，然后用UV、荧光或MS方法检测；（3）直接分析：用色谱柱分离后，无需衍生化就使用MS检测样品。 通过直接法分离利用了反相色谱法或使用离子对试剂的亲水作用色谱法（HILIC），本报告介绍的是使用HILIC法进行直接分析的应用。 除了17种蛋白氨基酸外，还选择牛磺酸（贝壳中含有）、茶氨酸、γ-氨基丁酸（GABA）（包括α和β异构体，茶叶中含有）进行分析，总共22种物质。使用TSKgel NH2-100 3 μm氨基柱和甲酸/甲酸铵水溶液和乙腈进行梯度洗脱分离。使用ESI电离法处理各氨基酸的质子化分子[M+H]+，用作检测离子。在该分析条件下，亮氨酸、异亮氨酸和GABA（α、β和γ异构体）的分离效果令人满意。另外，在该分析条件下制备的各氨基酸校准曲线在5到500 μmol/L的浓度范围内都呈现出良好线性。