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锤子
水是最常见的细胞成分,因此,它对于保持细胞超微结构来说,非常重要。目前,固定细胞成分且同时不会引起显著结构变化的唯一方式,就是冷冻固定技术。目前采用的两种常规方法:投入冷冻和高压冷冻。 相对于化学固定技术,冷冻固定技术有两个显著优势,仅需几毫秒时间即可完成冷冻固定过程,还能够保证同时固定所有大分子复合物。很多蛋白质的相互作用结构极不稳定,即使最轻微的渗透作用或温度变化也会致其结构分离,而冷冻固定能够最大程度减少上述不利影响。在生物学样品研究过程中,运用这些技术能够保持超微结构的良好形态,便于动态过程的研究工作。目前,实现较厚(达 200µm)样品玻璃化冷冻固定的唯一途径就是高压冷冻。
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