徕卡课堂 | 高压冷冻技术介绍

水是最常见的细胞成分，因此，它对于保持细胞超微结构来说，非常重要。目前，固定细胞成分且同时不会引起显著结构变化的唯一方式，就是冷冻固定技术。目前采用的两种常规方法：投入冷冻和高压冷冻。 相对于化学固定技术，冷冻固定技术有两个显著优势，仅需几毫秒时间即可完成冷冻固定过程，还能够保证同时固定所有大分子复合物。很多蛋白质的相互作用结构极不稳定，即使最轻微的渗透作用或温度变化也会致其结构分离，而冷冻固定能够最大程度减少上述不利影响。在生物学样品研究过程中，运用这些技术能够保持超微结构的良好形态，便于动态过程的研究工作。目前，实现较厚（达 200µm）样品玻璃化冷冻固定的唯一途径就是高压冷冻。