细胞电融合实验

的要求 使学生在了解电融合原理的基础上，学会掌握各种细胞悬液的制备及电融合过程的操作方法。 实验原理 游离的动物细胞或原生质体，置于电融合室中，在高频交流电场的作用下，细胞被极化，成为偶极子，造成细胞之间相互连接，如果施加的高频交流电压（既正弦波的P-P值）过高或作用时间过长，则细胞连接成串珠状，应适当控制以上条件，尽量是两细胞处于点接触状态；然后施加方波脉冲予以刺激，由于电脉冲的瞬间作用，可击破两细胞接触点部位的质膜，此时质膜脂类分子发生重组，同时由于细胞表面的张力作用，使两细胞融合逐步完成。 实验用品 器材：JCF-1型细胞电融合仪、细胞融合池、普通离心机、倒置显微镜（或研究用显微镜）刻度离心管、刻度吸管、小烧杯（10ml）等。 试剂：甘露醇、蔗糖、氯化钠等。 材料：鸡血。 实验方法 一、动物细胞的制备 用灭菌的注射器先吸入Alsver液(葡萄糖2.05g，枸橼酸钠0.8g，NaCl 0.42g，加重蒸水100ml) 1ml，再从鸡的翼下静脉取血0.5～1ml，取出后放入刻度离心管中，再加入2~3ml Alsver液，使总量为4~5ml，混匀并封口，置于4℃冰箱内可供一周内使用。