湘仪离心机：高效液相色谱(HPLC) 法测血清维生素C 含量.pdf

本文建立更简便、快速、准确、灵敏的测定血清维生素 C 含量的方法, 并对血清维生素 C 稳定性进行研究。方法 血清样品经 10% (vöv) 偏磷酸溶液提取, 旋涡混匀 30 s, 离心 10 m in (4 000 röm in, 4 ℃) 后, 用带二极管阵列检测(DAD ) 的高效液相色谱(H PL C) 仪对维生素 C 进行定性定量分析, 流动相为 100 mmo löL KH2PO 4, pH 值为 310, 检测波长为 243 nm , 流速为 1 m löm in。用此方法测定不同处理和储存条件下的血清维生素 C 含量, 比较其稳定性。结果 在上述色谱条件 下, 血清中维生素 C 能得到良好分离, 该方法的日内变异系数和日间变异系数分别为 0142% 和 2111% ; 回收率范围为 82%～ 8815% ; 维生素C 的最低检测限为 0105 Λgöm l。在对血清维生素C 稳定性的研究中, 发现血清维生素C 在放置过程 中很容易被氧化降解, 其偏磷酸提取液相对稳定, 但在 5 d 后含量也开始明显下降, 到第 44 d 后血清和提取液中维生素 C 含量均几乎完全消失。结论 建立了高速、高效、高灵敏度的测定血清维生素 C 含量的H PL C 法; 血清维生素 C 在保存过 程中极不稳定, 获得样品后应立即测定, 当无条件立即分析样品时, 也应将样品用偏磷酸提取, 并将提取液冷冻保存在- 70 ℃, 5 d 以内分析完毕。