分光光度计分析法及光度计-工作原理

基于物质光学性质而建立起来的分析方法称之为光化学分析法，分为光谱分析法和非光谱分析法，光谱分析法是指在光（或者其他能量）的作用下，通过测量物质产生的发射光，吸收光谱或者散色光的波长和强度来进行分析的方法。在光谱中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法，称之为分光光度法。 紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200-400nm（近紫外区），可用于结构鉴定和定量分析。 可见吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围400-750nm，主要有于有色物质的定量分析。 以下是光的基于性质：光是一种电磁波，具有波粒二象性，光的波长性可分为A，频率V，光速C， 波数CM-1等这些数来描数。AV=C 波数=1/A=V/C 光是由光子流组成，光的能量E=HV=HC/A，光的波长越短（频率越高），其能量越大。 白光（太阳光）：由各种单色光组成了复合光 单色光：单波长的光（由具有相同能量的光子组成） 分光光度计的工作原理：溶液中的物质在光的照射激发下，产生对光吸收的效应，这种吸收是具有选择性的，各种不同的物质都有各自的吸收光谱，因些当某单色光通过溶液时其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，即符合朗伯尔—比尔定律 T = I/I0 LogI0/I = KCL A = KCL 其中： T 透射比 I0 入射光强度 I 透射光强度 A 吸光度 K 吸收系数 L 溶液的光程长 C 溶液的浓度 通常做物质鉴定、纯度检查，有机分子结构的研究。