利用 HILIC 和反相色谱法分析促红细胞生成素糖肽和糖型

肽图分析是一种综合表征蛋白生物治疗药物的重要技术。通常采用反相UHPLC/HPLC 法进行分析，但是如果消化物中含有亲水性多肽，例如糖肽，则会丢失一些重要信息。本应用简报报导了将Agilent ZORBAX 快速高分离度300-HILIC 1.8 μm LC 色谱柱与飞行时间质谱(TOF MS) 联用，可实现糖蛋白红细胞生成素（EPO，一种控制红细胞生成的糖蛋白激素）消化物的肽图分析。利用HILIC（亲水作用色谱）流动相中的高有机溶剂体系，可在HILIC 色谱柱上实现糖肽的有效溶解、保留及分离。本应用简报通过比较分离效果、序列覆盖率以及反相和HILIC 数据，证实了HILIC 是RPLC/MS 多肽分析的一种正交、互补的方法。